浅析妇舒丸质量标配规则医学期刊发表
发布时间：2014-04-04
【摘要】 目的:建立妇舒丸的质量标准。方法:采用薄层色谱法对甘草进行鉴别，采用高效液相色谱法测定牡丹皮、白芍中的丹皮酚的含量。结果:甘草的薄层色谱结果好，阴性无干扰;丹皮酚在0.0429～0.4292μg范围内具有良好的线性关系，r=0.9996，平均加样回收率97.71%，RSD=1.45%。结论:所建立的质量标准可有效的控制妇舒丸的质量。
【关键词】 妇舒丸,质量标准,高效液相色谱法,丹皮酚
妇舒丸是由当归、川芎等二十三味药组成，具有补气养血、调经止带作用，临床常用于气血凝滞，子宫寒冷，月经不调等病症。原质量标准中未制含量测定项目，薄层鉴别项目较少，在对本品进行质量标准研究后，新增了对本品处方中甘草等药味的薄层鉴别， 并采用高效液相色谱法对牡丹皮、白芍所含丹皮酚进行含量测定。
1 仪器与试药
日本岛津LC-10AT VP 高效液相色谱仪，SPD-10A VP 紫外检测器，7725i手动进样器，浙江大学N2000色谱性。
数据工作站，丹皮酚化学对照品(由中国药品生物制品检定所提供，批号:0708-200304，规格:供含量测定用)。所用试剂均为色谱纯和分析纯。
2 甘草的定性鉴别
取本品6g，加硅藻土3g，研匀，加甲醇30ml，超声处理20min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml溶解，用乙醚提取2次，每次10ml，弃去乙醚液，用水饱和正丁醇提取2次，每次10ml，合并正丁醇液，用10%氨水提取2次，每次10ml，弃去正丁醇液，氨水液用5%盐酸调至酸性，用水饱和正丁醇提取2次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，加甲醇同法制成对照药材溶液。吸取上述供试品溶液15μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯—甲酸—冰醋酸—水(15:1:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3 含量测定
3.1 色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇—水(55:45)为流动相;检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计算应不低于5000。
3.2 对照品及供试品溶液的制备
3.2.1 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。
3.2.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品约15g，精密称定，加硅藻土10g，研碎，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇100ml，密塞，称定重量，超声处理(功率150W，频率40kHz)45min，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密量取2ml，置10ml容量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，即得。
3.2.3 阴性对照品溶液的制备及测定 取不含牡丹皮、白芍的处方，按制备工艺制成缺牡丹皮、白芍的阴性对照品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。按含量测定方法测定，结果表明本法具有良好的专属性。
3.3 线性关系考察 精密吸取丹皮酚对照品溶液2、5、10、15、20μl注入液相色谱仪，以进样量(μl)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，丹皮酚的回归方程Y=54460.79X+20892.87，r=0.9996。由此确定丹皮酚线性范围为0.0429-0.4292μg。
3.4 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液各5μl， 分别注入液相色谱仪，连续进样5次，依法测定，记录峰面积积分值，计算，考察精密度。结果RSD为0.40%，表明机器精密度较好。
3.5 重复性试验 精密称取同一批样品共5份，按供试品溶液项下制备方法，依法独立测定，测定样品含量，以考察本法的重现性。结果RSD为2.61%，表明该方法重现性良好。
3.6 加样回收率试验 精密称取同法测定的已知含量样品(627.74μg.g)共5份，分别精密加入对照品(21.46μg.ml)10ml，依法测定，计算回收率。结果丹皮酚平均回收率97.71%，RSD=1.45%，表明本法准确性较好，方法可行。
3.7 稳定性试验 精密吸取同一对照品溶液、同一供试品溶液各5μl，每隔一定时间分别注入液相色谱仪，依法测定，以丹皮酚峰面积积分值为指标，测定其稳定性。结果在0-36h内丹皮酚对照品和供试品的RSD分别为2.32%和2.39%，表明在此时间范围内对照品溶液和供试品溶液具有良好的稳定性。
3.8 样品测定 取样品3批，批号050401、050402、050403，按供试品溶液制备方法处理，照上述含量测定方法测定。3批样品含量(mg.g)测定结果分别为0.5747、0.5394、0.6080。
4 讨论
4.1 本制剂成分复杂，甘草、延胡索、黄芩的薄层鉴别，曾试用多种提取方法和展开系统，色谱都不太清晰。经实验摸索，使用文中所述条件后，分离效果好，显色清晰，阴性对照品无干扰。
4.2 在含量测定供试品溶液制备中，根据被提取成分丹皮酚的溶解性，采用70%甲醇为提取溶剂。分别选择超声提取法和加热回流提取法提取，结果超声提取法与回流提取法的提取效率相近，故选择超声提取，操作简便易行。因本品为水蜜丸，粉碎困难，且有效成分不易提取完全，故将本品与适量硅藻土混合后再进行粉碎，便于粉碎和有效成分的提? ?
根据中国药典(2005版一部)中牡丹皮项下的丹皮酚测定方法，选择甲醇—水(55:45)作为流动相，分离效果较好，丹皮酚峰与其它峰达到了良好的分离度(R>1.5)，故采用此色谱条件进行含量测定。
